进行分析。蛋白质印迹法制备全细胞提取物并在梯度聚丙烯酰胺上解析蛋白质如前所述。使用的一抗如下抗抗抗和抗购自,抗抗抗产品抗抗抗抗抗抗细胞周期蛋白和抗购自抗肌动蛋白购自。 使用与辣根过氧化物酶缀合的小鼠或兔抗体作为二抗。使用增强化学发光试剂盒来检测发光。荧光素酶测定暴露小时后用不同浓度的小檗碱处理同基因细胞系和。
根据制造商的说明使用荧光素酶测定系统暴露
于小檗碱后测定荧光素酶表达水平。染色质免疫沉淀分析如前所述使用进行测定以确定和与启动子区域的结合。使用单克隆小鼠抗和单克隆小鼠抗进行免疫沉淀。 使用启动子正巴林 手机号码向引物,对和的结合进行定量。反应包括在°下初始变性分钟然后在°秒°秒和°秒进行个循环如前所述。
产物通过琼脂糖凝胶电泳进行分析。细胞活力
测定将细胞以个细胞孔的浓度铺在孔板中并孵巴哈马电话号码列表育过夜然后暴露于各种浓度,μ的化合物中长达和小时。如前所述使用染料测定细胞活力。使用多重检测酶标仪在处测量吸光度。测定和流式细胞术用不同浓度的小檗碱处理细胞长达小时并使用荧光检测试剂盒按照制造商的方案测量活性。
