转染测定,寡核苷酸和,增强型

绿色荧光蛋白作为对照用于反义实验。所有,甲基寡核苷酸均由,如前所述等人合成并以浓度使用。 细胞以每孔×个细胞铺在六孔板中每个条件有个重复孔根据制造商的方案用奥斯汀德克萨斯州美国转染并在转染后和小时通过,计数。质粒构建和细胞集落形成测定通过以有义方向克隆中包含的基因组序列来构建表达质粒哺乳动物表达载体西雅图华盛顿州美国的克隆位点。

使用的引物如下正向,。如所述通过印迹评

估的表达并且使用水平的蛋白质印迹来显示和构建体的转染效率相同。 细胞以的密度接种在培养皿中并用μ或转染。小时后添加抗生素遗传霉素；。药物选择开始两周后固定细台湾手机号码胞并用结晶紫结晶紫溶于甲醇染色。结果与正常甲状腺的表达谱我们使用微阵列来评估个和个正常甲状腺组织的表达谱。

正常甲状腺样本均与其相应的癌样本相匹配

通过应用方差分析我们获得了正常甲状腺和肿瘤甲状腺之间差异表达的列表表。 在某塞内加尔电话号码列表些情况下观察到相应前体水平的改变数据未显示。与正常组织相比肿瘤组织中有种过表达其倍数变化等于或高于它们是和。相比之下所分析的在肿瘤样本中的表达均未显示出两倍以上的减少。然后我们决定集中研究其中三个进行进一步研究因为它们表现出最高的倍数变化。